服务介绍:
纳米流式(NanoFCM)是单颗粒水平外泌体表征技术。将外泌体样本进行荧光抗体标记后上机检测,在单个囊泡层面同时获取颗粒大小、颗粒浓度以及表面靶蛋白阳性率,相比传统 WB 只能测总蛋白,NanoFCM 可以统计携带目标标志物的外泌体占比,是高水平外泌体文章常用鉴定手段。
检测原理:
外泌体样本经荧光标记抗体孵育,特异性结合外泌体表面靶标蛋白;样本进入纳米流式检测通道,单个颗粒依次通过激光探测区,仪器采集散射光信号获取粒径信息,采集荧光信号判断目标蛋白是否表达,统计阳性颗粒占比与颗粒浓度。
样本要求:
- 样本:PBS 重悬的纯化外泌体样本;
- 样本体积:≥50 μL / 样本;
- 样本适宜浓度:10⁷–10⁹ particles/mL;
- 样本避免反复冻融,无细菌、蛋白聚集污染;
- 送样时请提供需要检测的靶标(CD63、CD81、CD9 等);
- 干冰低温寄送。
检测指标:
- 外泌体颗粒浓度
- 粒径分布
- 目标蛋白阳性外泌体比例
- 荧光信号散点图、统计直方图
交付内容:
- NanoFCM 原始检测数据文件
- 散点图、直方图结果图
- 完整检测报告,包含阳性率、粒径、浓度统计结果
注意事项:
- 样本中的蛋白聚集体、杂质纳米颗粒会干扰检测,外泌体纯化效果会直接影响结果;
- 荧光标记条件需要预实验评估,多指标联合检测请提前沟通;
- NanoFCM 检测为单颗粒层面分析,可与 WB、TEM 联合使用,满足期刊对外泌体多维度鉴定要求。