服务介绍:
RNA 转录组测序(RNA-seq)是基于高通量测序技术,对样本全部 mRNA 进行捕获建库与测序分析,全面检测样本基因表达水平,筛选差异表达基因,开展 GO、KEGG 富集等生物信息学分析。可从转录层面解析基因表达变化,挖掘关键功能基因,广泛用于分子机制、疾病模型、药物及中药作用靶点等科研研究。
实验原理:
提取样本总 RNA,质控合格后富集 mRNA,将 mRNA 片段化并反转录合成 cDNA,构建测序文库;文库经高通量测序得到原始 reads,经过滤、比对、基因表达量计算,筛选组间差异基因,后续开展功能富集、蛋白互作等多维度生物信息分析,解析样本转录水平变化。
技术优势:
- 检测范围广:全转录本无偏检测,可同时获得已知和新的转录本信息。
- 灵敏度高:能够识别低表达基因,精准捕获组间基因表达差异。
- 分析内容丰富:包含差异基因筛选、GO/KEGG 富集、GSEA、蛋白互作网络等标准分析。
- 样本兼容性强:支持动物组织、细胞沉淀等多种样本类型。
- 数据可靠:标准化建库测序流程,质控体系完善,数据可直接用于文章发表。
应用方向:
- 差异基因筛选:对比对照组、模型组、给药组之间基因 mRNA 表达差异。
- 分子机制研究:挖掘疾病、药物干预、基因改造后核心调控通路与靶基因。
- 信号通路解析:通过富集分析,定位激活或抑制的关键信号通路。
- 候选靶标挖掘:筛选潜在关键基因,为后续 qPCR、WB 验证提供候选靶点。
样本要求:
- 样本类型:动物组织、细胞沉淀。
- 样本保存:离体样本立即液氮速冻,-80℃长期保存,严禁常温放置,防止 RNA 降解。
- 运输方式:全程干冰低温运输,禁止反复冻融。
- 实验设计:提前确认分组、生物学重复数量,明确测序数据量需求。
注意事项:
- RNA 完整性是测序成功的核心,RNA 降解会直接导致建库失败或数据质量下降。
- 建议设置生物学重复,提升差异基因统计可靠性。
- 交付的生物信息分析结果为预测数据,关键基因建议使用 qPCR/WB 进行实验验证。
- 本服务仅用于科研实验,不可用于临床诊断及人体医疗相关用途。