服务介绍:
WB 趋势(整膜)服务,即通过 Western Blot 实验对蛋白样本进行电泳分离、转膜和抗体孵育后,采集整张膜的化学发光信号,获得完整泳道与目的条带分布信息。本服务可用于观察目的蛋白表达趋势、比较多组样本间蛋白水平变化,以及评估蛋白修饰状态,适用于机制研究、药物干预、模型验证等科研项目。
实验原理:
样本蛋白经 SDS-PAGE 凝胶电泳分离后,通过电转膜转移至 PVDF 或 NC 膜;膜上蛋白依次与一抗、二抗反应并结合化学发光底物,使目的蛋白条带在成像系统中产生可检测信号。整膜成像保留全部泳道和背景信息,可直观比较不同样本间目的蛋白条带强弱趋势。
技术优势:
- 信息完整:保留整张膜的泳道分布与背景信息,便于观察蛋白表达趋势。
- 结果直观:目的蛋白条带清晰,适合多组样本间表达变化比较。
- 适配修饰检测:可用于磷酸化、乙酰化、泛素化等蛋白修饰水平分析。
- 实验规范:从电泳、转膜到抗体孵育、化学发光成像全程标准化操作。
- 交付灵活:可提供整膜发光图、泳道分布结果及实验说明。
应用方向:
- 蛋白表达趋势分析:比较对照组、模型组、药物处理组间目的蛋白表达变化。
- 信号通路研究:检测通路关键蛋白及其修饰状态变化,分析通路激活或抑制趋势。
- 药物机制研究:观察药物干预后目的蛋白或修饰蛋白的剂量依赖、时间依赖变化。
- 样本验证实验:验证过表达、敲低、敲除模型中目标蛋白水平变化趋势。
样本要求:
- 样本类型:细胞沉淀、动物组织、已提取蛋白样本等。
- 样本质量:蛋白应无明显降解,浓度与完整性满足电泳上样要求。
- 实验资料:提供目的蛋白名称、抗体信息、分子量范围、泳道分组及上样顺序。
- 保存运输:蛋白样本需低温保存,干冰运输,避免反复冻融。
注意事项:
- 整膜结果受蛋白质量、转膜效率、抗体特异性和发光条件影响。
- 客户需提供准确抗体信息及泳道分组顺序,否则可能影响结果判读。
- 蛋白样本避免降解和反复冻融,否则会造成条带模糊或结果异常。
- 本服务仅用于科研实验,不可用于临床诊断及人体医疗相关用途。