服务介绍:
RNA 提取联合逆转录是 qPCR、普通 PCR 实验的前置模板制备单项服务。本服务可从组织、细胞样本中提取高纯度总 RNA,去除基因组 DNA、蛋白及多糖杂质,再通过逆转录反应将 RNA 反转合成 cDNA,产出合格模板,可直接用于后续 PCR、荧光定量 qPCR 等核酸检测实验,本服务不含扩增检测步骤。
实验原理:
采用专用 RNA 裂解试剂裂解样本,充分释放细胞内 RNA,经过有机抽提、洗涤纯化获得完整总 RNA;后续以 RNA 为模板,在逆转录酶、引物、dNTP 体系下,将 mRNA 反转录合成互补 cDNA;全程 RNase‑free 防污染操作,保护 RNA 不降解,得到稳定的 cDNA 模板。
技术优势:
- RNA 保护体系完善:全程 RNase‑free 环境操作,抑制 RNA 酶降解,保障 RNA 完整性。
- 杂质去除彻底:有效去除基因组 DNA、蛋白、多糖、酚类等干扰杂质,降低后续 PCR 非特异扩增。
- 样本适配广泛:可处理动物组织、细胞沉淀等多种样本类型,根据样本特性调整裂解方案。
- 产物稳定性好:逆转录得到的 cDNA 稳定性强,可低温长期保存,适合多次扩增检测。
- 标准化流程:统一操作规范,批次差异小,适合大批量样本平行处理。
应用方向:
- 基因表达定量:为 qPCR 荧光定量 PCR 提供 cDNA 模板,检测基因 mRNA 表达水平。
- 基因片段扩增:普通 PCR 扩增目的基因片段,用于克隆、测序等分子实验。
- 分子机制研究:分析不同处理组、模型组的基因转录水平差异,支撑信号通路、药物机制研究。
- 基因分型检测:为样本基因转录本检测、可变剪切分析提供模板。
样本要求:
- 样本类型:动物组织、细胞沉淀样本。
- 样本保存:样本离体后迅速液氮速冻,‑80℃保存,严禁常温放置,防止 RNA 降解。
- 运输方式:干冰低温运输,避免反复冻融。
- 样本备注:样本如有高多糖、高脂肪特性,需提前告知,优化提取方案。
注意事项:
- RNA 极易降解,样本保存、运输条件是实验成功关键,常温放置、反复冻融会直接造成 RNA 降解,实验失败。
- 提取完成可提供 RNA 浓度与纯度检测数据。
- 本服务只负责 RNA 提取与逆转录,不包含后续 PCR 扩增实验。
- 本服务仅用于科研实验,不可用于临床诊断及人体医疗相关用途。