服务介绍:
腺病毒载体具有感染效率高、外源基因承载容量较大、不整合宿主基因组等特点。本服务提供目的基因克隆、重组腺病毒载体构建、病毒包装扩增、滴度检测与质量鉴定,交付高活性过表达腺病毒,适用于难以转染细胞、原代细胞、干细胞及体内动物实验。
实验原理:
将目的基因克隆至腺病毒穿梭载体,与腺病毒骨架质粒共转染包装细胞,通过同源重组或质粒转染产生重组腺病毒。病毒在包装细胞中复制扩增后,收集细胞裂解液或上清,经纯化、浓缩和滴度检测,获得高滴度过表达腺病毒。感染靶细胞后,外源基因游离于细胞核内,不整合宿主基因组,可实现高水平瞬时表达。
客户需提供信息:
- 目的基因名称、Gene ID 或序列;
- 物种来源:人、小鼠、大鼠等;
- 载体骨架及启动子选择;
- 筛选标记或荧光标记要求;
- 是否需要对照病毒。
交付内容:
- 重组腺病毒质粒 / 克隆;
- 测序报告;
- 浓缩过表达腺病毒原液;
- 病毒滴度检测报告;
- 完整实验报告。
注意事项:
- 腺病毒不整合宿主基因组,适合瞬时高表达实验;
- 部分细胞对腺病毒感染不敏感,感染效率需预实验评估;
- 腺病毒具有免疫原性,体内实验需关注动物个体差异;
- 目的基因过大可能影响包装效率;
- 建议同步购买对照病毒,排除载体本身对细胞状态的影响。