服务介绍：

RNAi 慢病毒包装基于 RNA 干扰原理，将靶向目的基因的短发夹 RNA 构建入慢病毒载体，通过三质粒系统包装获得高滴度慢病毒。病毒感染靶细胞后，shRNA 被转录并加工为 siRNA，介导靶 mRNA 降解，实现目的基因稳定敲低。适用于难以瞬时转染的细胞、原代细胞和长期基因沉默实验。

实验原理：

1. shRNA 设计与构建：针对目的基因序列设计多条 shRNA，筛选有效干扰靶点并克隆至慢病毒载体；
2. 慢病毒包装：重组 shRNA 载体与包装质粒共转染 293T 细胞，组装形成携带 shRNA 的慢病毒颗粒；
3. 感染与基因沉默：慢病毒感染靶细胞后，将 shRNA 表达盒整合至宿主基因组，持续表达 shRNA，经 Dicer 加工形成 siRNA，诱导靶 mRNA 降解，降低目的基因表达。

客户需提供信息：

1. 目的基因名称或 Gene ID；
2. 物种来源：人、小鼠、大鼠等；
3. 目标干扰区域或序列要求；
4. 载体骨架及筛选标记：Puromycin、GFP 等；
5. 是否需要阴性对照病毒。

交付内容：

1. 重组 shRNA 慢病毒载体（甘油菌 + 质粒）
2. 测序报告
3. 浓缩慢病毒原液
4. 病毒滴度检测报告
5. 完整实验报告

注意事项：

1. 需提供有效干扰序列；若客户未提供，可由我方辅助设计；
2. 不同基因和细胞系的敲低效率存在差异；
3. 建议设置至少一条阴性对照病毒，排除非特异性干扰；
4. 慢病毒感染效率受靶细胞类型、MOI 和细胞状态影响；
5. 实验完成后建议通过 qPCR 或 WB 验证敲低效果。